本文選題：嗜水氣單胞菌 + LAMP　； 參考：《中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào)》2016年01期

【摘要】：目的建立環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)對(duì)嗜水氣單胞菌檢測(cè)的方法,并用臨床標(biāo)本對(duì)該方法進(jìn)行評(píng)價(jià)。方法根據(jù)嗜水氣單胞菌desA基因的保守序列設(shè)計(jì)特異性引物,利用參考質(zhì)粒評(píng)價(jià)該檢測(cè)體系的靈敏度;用30種其他腸道致病菌及院內(nèi)感染中常見的致病菌評(píng)價(jià)該檢測(cè)體系的特異性;用糞便模擬樣本以及臨床樣本評(píng)價(jià)該檢測(cè)體系的臨床檢測(cè)的可行性。結(jié)果 LAMP檢測(cè)體系對(duì)嗜水氣單胞菌重組質(zhì)粒的檢測(cè)靈敏度為1×102拷貝/反應(yīng)體系;LAMP檢測(cè)體系在檢測(cè)30種其他腸道致病菌及院內(nèi)感染中常見的致病菌時(shí)未出現(xiàn)假陽(yáng)性;LAMP檢測(cè)體系在糞便模擬標(biāo)本中的檢測(cè)下限為5×103 CFU/g;通過(guò)與qPCR技術(shù)相比較,LAMP具有更高的靈敏度以及更優(yōu)秀的臨床標(biāo)本的檢測(cè)能力。結(jié)論本研究建立的LAMP方法是首次將LAMP技術(shù)運(yùn)用到了嗜水氣單胞菌的檢測(cè),所需儀器設(shè)備簡(jiǎn)單,可作為一種快速的篩查方法在臨床檢驗(yàn)和基層實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用。
[Abstract]:Objective to establish a Loop-mediated isothermal amplification method for the detection of Aeromonas hydrophila and evaluate it with clinical specimens. Methods specific primers were designed according to the conserved sequence of desA gene of Aeromonas hydrophila and the sensitivity of the detection system was evaluated by reference plasmid. The specificity of the detection system was evaluated with 30 other intestinal pathogens and common pathogens in hospital infection, and the feasibility of clinical detection was evaluated with fecal simulated samples and clinical samples. Results the sensitivity of LAMP system for the detection of recombinant plasmids of Aeromonas hydrophila was 1 脳 10 ~ 2 copies / reaction system. The detection limit of lamp in fecal simulated samples is 5 脳 10 ~ 3 CFU / g. Compared with qPCR technique, lamp has higher sensitivity and better detection ability of clinical samples. Conclusion the LAMP method established in this study is the first time to apply the LAMP technique to the detection of Aeromonas hydrophila. The instrument and equipment required are simple and can be used as a rapid screening method for clinical examination and basic laboratory.
【作者單位】： 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所 傳染病預(yù)防控制國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家重大傳染病防治科技重大專項(xiàng)(2013ZX10004-101)資助~~
【分類號(hào)】：R446.5

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本文編號(hào)：1940024