本文選題：液質(zhì)聯(lián)用 + 飛行時(shí)間質(zhì)譜��； 參考：《北京體育大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：目的本論文以選擇性性激素受體調(diào)節(jié)劑(SARMs)為主要研究對(duì)象,利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜、液相色譜-串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜來(lái)探索、建立人尿中選擇性性激素受體調(diào)節(jié)劑及其代謝物的檢測(cè)和評(píng)估方法,并使用建立的檢測(cè)方法檢測(cè)運(yùn)動(dòng)員樣品,以證明檢測(cè)方法的有效性,能保證出國(guó)運(yùn)動(dòng)員不出現(xiàn)興奮劑問(wèn)題。方法采用液液萃取(LLE)方法:取1ml尿液加入10μL×5 ppm的甲睪作為內(nèi)標(biāo),50μL葡萄糖醛酸甙酶,0.5 mL磷酸鹽緩沖鹽,震蕩混勻,于55℃水浴1 h,加0.5 mL堿性緩沖鹽,加4 mL甲基叔丁基醚,萃取,保留有機(jī)相,常溫氮?dú)饬鞔蹈?用初始流動(dòng)相溶解定容至100μL,進(jìn)樣分析;采用固相萃取(SPE)方法對(duì)代謝物進(jìn)行研究:Waters Sep-Pak C18固相萃取小柱(6CC,500mg)經(jīng)3mL甲醇活化、3mL去離子水洗滌,加入1ml大鼠尿液(或細(xì)胞培養(yǎng)液),3mL去離子水洗滌,3mL甲醇淋洗,收集甲醇溶液,60℃氮?dú)獗Ｗo(hù)下吹干,用150ul流動(dòng)相復(fù)溶,0.2umGHP濾膜過(guò)濾回收至進(jìn)樣瓶,進(jìn)樣分析。結(jié)果與討論采用常規(guī)篩查方法對(duì)7種選擇性雄激素受體調(diào)節(jié)劑類(lèi)藥物進(jìn)行方法驗(yàn)證工作,最低檢出限為0.01-2ng/ml,回收率均高于60%,日內(nèi)及日間精密度均低于20%,符合世界反興奮劑機(jī)構(gòu)技術(shù)文件中方法驗(yàn)證要求。采用大鼠實(shí)驗(yàn)及人體干細(xì)胞體外實(shí)驗(yàn)對(duì)3種藥物進(jìn)行了代謝研究,分別發(fā)現(xiàn)了多種代謝物。結(jié)論本研究建立了針對(duì)7種選擇性雄激素受體調(diào)節(jié)劑類(lèi)藥物的檢測(cè)方法,方法穩(wěn)定性好,符合WADA技術(shù)文件要求;并通過(guò)代謝實(shí)驗(yàn)對(duì)三種藥物進(jìn)行了系統(tǒng)的代謝研究,發(fā)現(xiàn)了多個(gè)代謝物,其中包括多個(gè)新代謝物。對(duì)200例樣品進(jìn)行了篩查工作,保證運(yùn)動(dòng)員干干凈凈參賽。
[Abstract]:Objective to study the determination and evaluation of selective hormone receptor modulators and their metabolites in human urine by liquid chromatography tandem mass spectrometry (liquid chromatography tandem mass spectrometry) and tandem time of flight mass spectrometry (SARMs). To prove the effectiveness of the detection method, it can ensure that the athletes abroad do not appear doping problem. Method using liquid liquid extraction (LLE) method: Taking 1ml urine with 10 mu L x 5 ppm as internal standard, 50 mu L glucuronase, 0.5 mL phosphate buffer salt, mixing, 1 h in 55 C water bath, 0.5 mL alkaline buffer salt, and 4 mL methyl tert butyl. Base ether, extraction, retention of organic phase and dry nitrogen air flow to dry, use initial flow phase to dissolve to 100 mu L, sample analysis; use solid phase extraction (SPE) method to study metabolites. Waters Sep-Pak C18 solid phase extraction column (6CC, 500mg) is activated by 3mL methanol, 3mL deionized water washing, 1ml rat urine (or cell culture), 3mL go away Subwater washing, leaching of 3mL methanol, collecting methanol solution, drying under 60 centigrade nitrogen gas protection, reusing 150ul liquid phase and recovering to sample bottle with 0.2umGHP filter membrane filtration, analysis. Results and discussion using conventional screening methods to verify 7 selective androgen receptor modulators, the minimum detection limit is 0.01-2ng/ml. The yield was higher than 60%, the intraday and daytime precision was less than 20%, which was in line with the requirements of the method verification in the World Anti Doping Agency technical documents. The metabolic study of 3 drugs was carried out in rats and human stem cells in vitro, and several metabolites were found. Conclusion this study was established for the regulation of 7 kinds of selective androgen receptor. The methods for the detection of drug drugs are stable and conform to the requirements of the WADA technical documents; and the metabolic study of three kinds of drugs is carried out through metabolic experiments. Several metabolites are found, including a number of new metabolites. 200 samples are screened to ensure the athletes to compete clean and clean.

【學(xué)位授予單位】：北京體育大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R446.12;O657.63

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本文編號(hào)：1796335