本文選題：鮑曼不動桿菌　切入點：耐藥基因　出處：《吉林大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的： 通過聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）方法研究本院鮑曼不動桿菌的耐藥機(jī)制，檢測臨床分離的82株鮑曼不動桿菌的耐藥情況，并檢測β-內(nèi)酰胺類耐藥基因、氨基糖苷修飾酶耐藥基因、喹諾酮類耐藥基因、I類整合酶基因和外膜蛋白基因的陽性率，為今后臨床用藥提供參考依據(jù)。 方法： 1.收集從2011年1月至2014年5月吉林大學(xué)第一醫(yī)院二部住院患者無菌體液標(biāo)本中分離出的鮑曼不動桿菌（非重復(fù)菌株），共82株，用BD phoenixTM-100全自動細(xì)菌鑒定/藥敏分析儀進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗，頭孢哌酮/舒巴坦的藥物敏感性檢測采用K-B法； 2.采用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）法對β-內(nèi)酰胺類耐藥基因（blaOXA-51, blaOXA-23,blaTEM, blaSHV, blaIMP, blaVIM）、氨基糖苷修飾酶耐藥基因（aac(6′)-I, aac(3′)-I,ant(3″)-I, ant(2″)-I）、喹諾酮類耐藥基因（gyrA, parC）、I類整合酶基因（intI1）和外膜蛋白基因（CarO）進(jìn)行檢測，1.5%瓊脂糖凝膠電泳后，凝膠成像系統(tǒng)觀察照相并分析。 3.對喹諾酮類耐藥相關(guān)基因（gyrA和parC）的PCR產(chǎn)物純化后做HinfI酶切分析，2.5%瓊脂糖凝膠電泳后，凝膠系統(tǒng)觀察照相，，隨機(jī)選部分耐藥株與敏感株測序分析并驗證藥敏結(jié)果。 結(jié)果： 1．藥敏結(jié)果：82株菌中有65株MDRAB，所有菌株對多粘菌素100%敏感，對亞胺培南、美羅培南和頭孢哌酮/舒巴坦的敏感率分別為41.5%、40.2%、29.3%，除阿米卡星、四環(huán)素、復(fù)方新諾明外，對其他藥物的敏感率均低于20%。 2．耐藥基因檢測結(jié)果：82株菌均能檢測到blaOXA-51、gyrA、parC基因，對blaOXA-23、intI1、blaTEM、aac(6′)-I、aac(3′)-I、ant(3″)-I、ant(2″)-I、CarO的檢出率分別為52.4%、73.2%、70.7%、56.1%、56.1%、65.9%、12.2%、90.2%，未檢出blaSHV、blaIMP、blaVIM等基因。 3．酶切結(jié)果：僅14（17.1%）株菌的gyrA基因產(chǎn)物能被HinfI酶切開，23（28.0%）株菌的parC基因產(chǎn)物能被HinfI酶切開，測序結(jié)果顯示喹諾酮類耐藥株有基因突變。喹諾酮耐藥株gyrA基因的83位氨基酸由Ser變?yōu)長eu，parC基因的80位氨基酸由Ser變?yōu)長eu；在parC基因被切開的耐藥菌株中發(fā)現(xiàn)一種新的突變，84位氨基酸由Glu變?yōu)镚ly，與以往報道的Glu變?yōu)長ys不同。 結(jié)論： 1.82株鮑曼不動桿菌耐藥情況嚴(yán)重，大都為多重耐藥鮑曼不動桿菌，碳青霉烯類抗生素敏感率最高；14種耐藥基因能檢測到11種，未檢測到blaSHV、blaIMP、blaVIM等基因，可能存在地區(qū)差異性。 2.攜帶blaOXA-23基因與鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類抗生素耐藥有關(guān)；產(chǎn)OXA-23、OXA-51、TEM型β-內(nèi)酰胺酶可能是本院鮑曼不動桿菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的主要原因。 3. aac(6′)-I、aac(3)-I、ant(3″)-I基因在本院鮑曼不動桿菌對氨基糖苷類藥物耐藥方面起重要作用，ant(2″)-I不是導(dǎo)致本院氨基糖苷類耐藥的主要基因。 4.喹諾酮類耐藥基因gyrA、parC突變率高導(dǎo)致耐藥情況嚴(yán)重，gyrA基因比parC基因在喹諾酮類耐藥方面發(fā)揮更大的作用；在parC基因中發(fā)現(xiàn)新型突變模式，84位氨基酸由Glu變?yōu)镚ly，但是否與喹諾酮耐藥有關(guān)仍需驗證。
[Abstract]:Objective:
By polymerase chain reaction (PCR) method to study the Bauman resistance mechanisms, detection of clinical isolates of 82 strains of Bauman Acinetobacter resistance, and detection of beta lactam resistance genes, resistance genes of aminoglycoside modifying enzymes, quinolone resistance genes and class I integron positive rate of enzyme gene and membrane protein the gene, for the future to provide reference for clinical medication.
Method錛

本文編號：1609563