本文關(guān)鍵詞： 粘質(zhì)沙雷菌 ESBLs AmpC酶 碳青霉烯酶 PCR 抗菌藥物 體外聯(lián)合藥敏試驗　出處：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的為了了解粘質(zhì)沙雷菌的產(chǎn)酶性以及對抗菌藥物的體外抗菌活性,探討其耐藥性,并為聯(lián)合用藥模式對臨床產(chǎn)酶菌感染的治療提供實驗室依據(jù)。本試驗第一部分對咸陽地區(qū)(陜西省核工業(yè)二一五醫(yī)院、咸陽市第一人民醫(yī)院、中鐵二十局醫(yī)院)從2009年1月至2012年12月臨床分離出的106株粘質(zhì)沙雷菌從臨床的來源、感染特點及耐藥情況進行了統(tǒng)計分析;第二部分實驗,通過對ESBLs、Amp C酶和碳青霉烯酶的檢測,了解本地區(qū)粘質(zhì)沙雷菌的產(chǎn)酶特性,并對產(chǎn)酶菌株選擇臨床常用的抗菌藥物進行體外聯(lián)合藥敏試驗,檢測其聯(lián)合藥物對產(chǎn)酶菌的體外抗菌活性特點,對其臨床上感染的控制及耐藥菌株的播散起到重要的指導(dǎo)作用。方法1.收集咸陽地區(qū)(陜西省核工業(yè)二一五醫(yī)院、咸陽市第一人民醫(yī)院、中鐵二十局醫(yī)院)從2009年1月至2012年12月臨床分離出的106株粘質(zhì)沙雷菌,對其臨床分布情況、常見抗生素的耐藥性以及重癥醫(yī)學(xué)科與普通病房的感染特點進行分析。2.ESBLs檢測:在106株粘質(zhì)沙雷菌中,用頭孢噻肟或頭孢他啶進行產(chǎn)ESBLs初篩試驗,對耐藥菌株采用雙紙片協(xié)同確認(rèn)試驗(頭孢噻肟和頭孢噻肟/克拉維酸,頭孢他啶和頭孢他啶/克拉維酸)進行ESBLs的檢測;PCR檢測產(chǎn)ESBLs菌株的耐藥基因。3.Amp C酶檢測:用頭孢西汀紙片進行初篩試驗,然后采用三維試驗進行確證,PCR檢測Amp C酶耐藥基因。4.碳青霉烯酶的檢測:應(yīng)用改良Hodge試驗對8株耐碳青霉烯酶類藥物細菌篩選產(chǎn)酶株;PCR技術(shù)檢測KPC型碳青霉烯酶耐藥基因。5.聯(lián)合藥敏試驗:采用棋盤稀釋法對產(chǎn)酶粘質(zhì)沙雷菌進行體外聯(lián)合藥敏試驗,計算FIC指數(shù),判斷藥物聯(lián)合體外抗菌活性效果。6.統(tǒng)計學(xué)方法:采用X檢驗,P0.05為具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果1.菌株來源:從咸陽地區(qū)共分離獲得106株粘質(zhì)沙雷菌,其中以痰液標(biāo)本最多,占84.1%(89/106),其次為分泌物、尿液和咽拭子,分別為4株、3株、3株;菌株來源科室主要為重癥醫(yī)學(xué)科(ICU)41.5%(44/106)株、呼吸內(nèi)科15.1%(16/106)、神經(jīng)外科13.2%(14/106)和腎內(nèi)科9.4%(10/106)。2.臨床藥敏試驗結(jié)果:106株粘質(zhì)沙雷菌對一、二代頭孢菌素的耐藥率均在90%以上;對三、四代頭孢菌素類藥物耐藥率在20%左右;對氨基糖甙類藥物、氟喹諾酮類藥物及碳青霉烯酶類藥物的耐藥率均在10%以下。3.重癥醫(yī)學(xué)科與普通病房菌株的耐藥率結(jié)果:重癥醫(yī)學(xué)科和普通病房菌株的耐藥率為氨曲南36.7%和11.3%、頭孢吡肟為27.3%和8.1%、頭孢他啶為29.5%和14.5%、頭孢哌酮/舒巴坦為18.2%和8.1%、厄他培南為13.6%和3.2%,采用χ2檢驗,P0.05,具有統(tǒng)計學(xué)意義;而對氨芐西林、頭孢唑林、頭孢呋辛、環(huán)丙沙星、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、亞胺培南、美羅培南,重癥醫(yī)學(xué)科和普通病房的耐藥率分別進行χ2檢驗,P0.05,無統(tǒng)計學(xué)差別。4.產(chǎn)ESBLs的陽性率:106株粘質(zhì)沙雷菌中ESBLs初篩試驗陽性率34.9%(37/106),,22株耐頭孢他啶,31株耐頭孢噻肟,其中有16株細菌對頭孢他啶和頭孢噻肟同時耐藥。經(jīng)雙紙片確證試驗陽性為33株,總陽性率為31.1%(28/106)。應(yīng)用PCR檢測ESBLs耐藥基因,共檢出28株陽性菌株,陽性率26.4%(28/106),28株產(chǎn)ESBL耐藥基因菌株中,CTX-M型75.0%(21/28),TEM型46.4%(13/28),SHV型10.7%(3/28)。21株產(chǎn)CTX-M型β-內(nèi)酰胺酶菌株中,CTX-M-1型5株,占23.8%(5/21);CTX-M-2型8株,占38.1%(8/21);CTX-M-9型15株,占71.4%(15/21)。有16株粘質(zhì)沙雷菌產(chǎn)兩種或兩種以上耐藥基因,為57.1%(16/28)。5.產(chǎn)Amp C酶陽性率:Amp C酶初篩試驗陽性率21.7%(23/106),三維確證試驗陽性10株,總檢出率9.4%(10/106)。PCR檢測耐藥基因陽性株有10株,與三維試驗結(jié)果一致,EBC型Amp C酶耐藥基因陽性株有6株,DHA型有3株,FOX型有1株,未檢出MOX型與CIT型耐藥基因。6.KPC型碳青霉烯酶陽性率:8株耐碳青霉烯酶類藥物菌株在改良Hodge試驗中,陽性率為75.0%(6/8),總陽性率為5.7%(6/106),應(yīng)用PCR檢測KPC型碳青霉烯酶耐藥基因,陽性株為4株,均為KPC-2型耐藥基因。7.常用抗菌藥物體外聯(lián)合藥敏試驗結(jié)果:對產(chǎn)ESBLs菌株,(哌拉西林/他唑巴坦)/阿米卡星、頭孢吡肟/阿米卡星、(哌拉西林/他唑巴坦)/環(huán)丙沙星、美羅培南/環(huán)丙沙星及美羅培南/阿米卡星FIC指數(shù)1的比率分別為32.2%、25.0%25.0%、25.0%和21.4%;對產(chǎn)Amp C酶菌株,(哌拉西林/他唑巴坦)/環(huán)丙沙星、(哌拉西林/他唑巴坦)/阿米卡星、美羅培南/阿米卡星、頭孢吡肟/阿米卡星、美羅培南/環(huán)丙沙星的FIC1的比率為40%、30%、30%、20%和20%,而頭孢吡肟/環(huán)丙沙星盡管其FIC1的比率為30%,但其FIC≥2的比率高達60%;對4株產(chǎn)碳青霉烯酶的菌株,FIC指數(shù)1的頭孢吡肟/阿米卡星有2株,(哌拉西林/他唑巴坦)/環(huán)丙沙星、美羅培南/環(huán)丙沙星及美羅培南/阿米卡星各有1株,對頭孢吡肟/阿米卡星和(頭孢哌酮/舒巴坦)/阿米卡星均有1株FIC≥2。結(jié)論咸陽地區(qū)粘質(zhì)沙雷菌標(biāo)本來源以痰液為主,重癥醫(yī)學(xué)科檢出率最高。菌株對抗生素敏感率整體較好,對一、二代頭孢菌素類藥物的耐藥率很高;對三、四代頭孢菌素類藥物的敏感性較好,仍可作為臨床常規(guī)用藥;對氨基糖苷類藥物、氟喹諾酮類藥物和碳青霉烯酶類藥物的敏感性較高,作為嚴(yán)重感染的首選藥物。值得我們注意的是,粘質(zhì)沙雷菌對各類抗生素的耐藥率呈逐年上升趨勢,且已有耐碳青霉烯酶類藥物的菌株出現(xiàn)。重癥醫(yī)學(xué)科檢出菌株的耐藥率明顯高于普通病房,尤其是氨曲南、頭孢吡肟、頭孢他啶、頭孢哌酮/舒巴坦和厄他培南。對ESBLs、Amp C酶和碳青霉烯酶均有一定比例的產(chǎn)酶株出現(xiàn),產(chǎn)酶是粘質(zhì)沙雷菌耐藥的主要機制。產(chǎn)ESBLs粘質(zhì)沙雷菌以CTX-M型和TEM型耐藥基因為主,攜帶多重耐藥基因菌株比例較高;Amp C酶耐藥基因以EBC型為主,DHA型和FOX型也有檢出;碳青霉烯酶以KPC-2型耐藥基因為主�？咕幬锏穆�(lián)合使用對一些由產(chǎn)酶株引起的嚴(yán)重感染具有一定的加強作用,對產(chǎn)ESBLs菌株引起的感染,可使用頭孢吡肟/阿米卡星和(哌拉西林/他唑巴坦)/環(huán)丙沙星的聯(lián)合方案;對產(chǎn)Amp C酶的粘質(zhì)沙雷菌,可以選擇(哌拉西林/他唑巴坦)/阿米卡星和(哌拉西林/他唑巴坦)/環(huán)丙沙星的聯(lián)合模式;頭孢吡肟/阿米卡星和(哌拉西林/他唑巴坦)/環(huán)丙沙星可用于產(chǎn)碳青霉烯酶的粘質(zhì)沙雷菌引起的感染,為臨床醫(yī)生選擇聯(lián)合用藥提供依據(jù)。
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【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R446.5

【參考文獻】

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1 陳堅;徐春泉;屠鴻翔;;醫(yī)院感染粘質(zhì)沙雷菌的耐藥分析[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2009年12期

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本文編號：1519960