環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)結(jié)合橫向流動試紙條檢測豬鏈球菌2型的應(yīng)用研究
本文關(guān)鍵詞: 豬鏈球菌型 cpsJ基因 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增 橫向流動試紙條 出處:《中國人獸共患病學(xué)報(bào)》2016年12期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的建立一種豬鏈球菌2型的快速檢測方法。方法以豬鏈球菌2型cps2J基因序列為檢測靶標(biāo)設(shè)計(jì)6條環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)特異性引物,其中2條促環(huán)引物分別標(biāo)記異硫氰酸熒光素(FITC)和地高辛(Dig),用橫向流動試紙條(LFD)檢測擴(kuò)增產(chǎn)物,建立豬鏈球菌2型LAMP-LFD檢測方法。結(jié)果所建立的檢測方法能夠特異性的檢測出豬鏈球菌2型,與試驗(yàn)對照菌株不存在交叉反應(yīng),其最低檢測限為76cfu/mL,在對100份樣品的檢測中,LAMP-LFD方法檢測出14份陽性樣品,培養(yǎng)法檢測出12份陽性樣品,LAMP-LFD方法檢測陽性率略高于病原培養(yǎng)法,兩者間的P0.05無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論所建立LAMP-LFD檢測方法具有特異性好、敏感性高、操作簡單、快速等特點(diǎn),適合于動物食品中豬鏈球菌2型的檢測。
[Abstract]:Objective to establish a rapid detection method for Streptococcus suis type 2. Methods six specific primers for isothermal amplification of streptococcus suis type 2 were designed using cps2J gene sequence of Streptococcus suis type 2 as the detection target. Two ring stimulating primers were labeled with fluorescein isothiocyanate (FITC) and digoxigenin (Digg) respectively, and the amplification products were detected by LFDs. The detection method of Streptococcus suis type 2 LAMP-LFD was established. Results the method was able to detect Streptococcus suis type 2 specifically, and there was no cross reaction with the control strain. The lowest detection limit was 76cfu-mL. in 100 samples, 14 positive samples were detected by LAMP-LFD and 12 positive samples were detected by culture method. The positive rate of LAMP-LFD method is slightly higher than that of pathogen culture method, there is no statistical difference between them (P0.05). Conclusion the established LAMP-LFD detection method has good specificity and high sensitivity. Simple and rapid operation, suitable for the detection of Streptococcus suis type 2 in animal food.
【作者單位】: 天津市畜牧獸醫(yī)研究所;中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所;
【基金】:國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃資助項(xiàng)目(No.2012AA101605) 天津市農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化與推廣項(xiàng)目(No.201301030) 天津市農(nóng)業(yè)科學(xué)院基金項(xiàng)目(No.16003)聯(lián)合資助~~
【分類號】:R440
【正文快照】: (1.Tianjin Veterinary Research Insititution,Tianjin300384,China;2.China Institute of Veterinary Drug Control,Beijing100081,China)豬鏈球菌病(swine streptococcosis)是由C、D、F及L群鏈球菌引起的豬的多種疾病的總稱,急性型常表現(xiàn)為出血性敗血癥和腦炎,慢性型以關(guān)節(jié)
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級參考文獻(xiàn)】
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本文編號:1442119
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