本文關(guān)鍵詞：江蘇省豬鏈球菌血清2型菌株耐藥性與分子特征研究　出處：《東南大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：背景：豬鏈球菌(Streptococcus suis, S. suis),一種重要的人獸共患病病原菌。根據(jù)菌體莢膜多糖的多樣性,豬鏈球菌被分為35個血清型,其中豬鏈球菌血清2型(Streptococcus suis serotype 2)是毒力最強也是世界范圍內(nèi)引起人和豬感染發(fā)病的主要病原菌,同時也是國內(nèi)最常見的致病血清型。近幾年豬鏈球菌血清2型菌引起關(guān)注不僅僅是因為越來越多的嚴(yán)重人間感染豬鏈球菌的報道,而且廣泛出現(xiàn)豬鏈球菌多重耐藥的報道。因此了解江蘇省高致病性豬鏈球菌血清2型菌株的耐藥情況及分子特征對于人感染豬鏈球菌病的防控和治療具有重要意義。方法：1.收集江蘇省1998-2010年間人感染及相關(guān)的高致病性豬鏈球菌血清2型菌株,同時收集相關(guān)流行病學(xué)資料。2.根據(jù)美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI)標(biāo)準(zhǔn)用K-B紙片法(K-B Disk Diffusion test)對臨床常用的14種抗菌藥物進(jìn)行耐藥性研究。3.采用PCR方法對豬鏈球菌血清2型菌株大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥基因(ermA、ermB和mefA)、四環(huán)素耐藥基因(tet(M),tet(O),tet(W)、tet(O/W/32/O)、tet(L)、tet(K)和轉(zhuǎn)座子Tn916)和氨基糖苷類抗生素耐藥基因(Aph3’)進(jìn)行檢測分析。4.采用PCR方法檢測豬鏈球菌血清2型菌株的6種毒力基因(cps2j, mrp, ef, sly, gapdh,fbps),了解毒力基因的攜帶情況。5.運用多位點序列分型(Multilocus sequence typing, MLST)和多位點串聯(lián)重復(fù)序列分析(Multiple-locus variable number tandem repeat analysis, MLVA)兩種分子分型方法對江蘇省豬鏈球菌血清2型菌株進(jìn)行分子分型并與國內(nèi)外參考菌株進(jìn)行聚類分析。結(jié)果：1.1998-2010年江蘇省共收集到高致病性豬鏈球菌血清2型菌株27株。其中從病人體內(nèi)分離到19株(19/27,70.4%),從病死豬及豬肉產(chǎn)品中分離到8株(8/27,29.6%)。2.分離株對鏈霉素和四環(huán)素的耐藥率最高,為100%,其次為復(fù)方新諾明,耐藥率為40.74%,對紅霉素和阿奇霉素的耐藥率為11.11%和7.41%；江蘇省豬鏈球菌血清2型菌株均對青霉素、頭孢類和氟喹諾酮類敏感。3.26株菌中存在tet(M)基因,在tet(M)基因陰性的菌中檢測到tet(O)基因；所有菌株均攜帶轉(zhuǎn)座子Tn916；所有菌株中均未發(fā)現(xiàn)氨基糖苷類耐藥基因(Aph3')和大環(huán)內(nèi)酯類耐藥基因(ermA、ermB和mefA)。4.本研究中所有江蘇省豬鏈球菌血清2型分離株均攜帶6種毒力基因(cps2j+mrp+ef+sly+gapdh+fbps)。5.26株菌的MLST基因型為ST7型(1-1-1-1-1-1-3),只有JS-26號菌為ST-1型(1-1-1-1-1-1-1)。6. MLVA方法將菌株分為13個基因型,大部分等位基因差異集中在TR9基因上。結(jié)論：1.1998年至2010年,江蘇省共收集到高致病性豬鏈球菌血清2型菌株27株。其中1998年(10株)和2005年(5株)分離到的菌株居多,這兩年也是國內(nèi)人感染豬鏈球菌病的高峰期。南通地區(qū)分離到的菌株較多(19株),這可能與當(dāng)?shù)卣�、衛(wèi)生、農(nóng)林部門對此病較重視,經(jīng)驗較豐富有關(guān),也可能當(dāng)?shù)刎i中豬鏈球菌感染情況較嚴(yán)重。2.江蘇省豬鏈球菌分離株對氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類及磺胺類藥物都具有較強的耐藥性,這可能與此四類抗生素在全球生豬產(chǎn)業(yè)中的廣泛使用甚至濫用有關(guān)。本研究中菌株均攜帶可產(chǎn)生核糖體保護(hù)蛋白的四環(huán)素耐藥基因(tet),這結(jié)果和表型結(jié)果相一致。本研究中豬鏈球菌株均不攜帶氨基糖苷類抗生素耐藥基因Aph3'(3’-磷酸轉(zhuǎn)移酶)基因和大環(huán)內(nèi)酯耐藥基因(ermA、ermB和mefA),可能與其他的耐藥基因或耐藥機理有關(guān)。3.本研究中所有菌株均攜帶6種毒力基因(cps2j+mrp+ef+sly+gapdh+fbps),從基因水平說明所有菌株為強毒株。4.本研究結(jié)果顯示26株江蘇分離株為ST7型,此型也是引起1998年江蘇省和2005年四川豬鏈球菌病暴發(fā)的分子型,同時是國內(nèi)人感染豬鏈球菌的優(yōu)勢基因型。2010年從南通病人體內(nèi)分離到的一株菌(JS-26)為STl型,2014年鹽城一病人疑似被ST1型豬鏈球菌感染,說明江蘇省同時存在ST1型和ST7型高致病性豬鏈球菌,應(yīng)在以后的監(jiān)測中密切關(guān)注基因型的變化。5.本研究發(fā)現(xiàn)MLVA方法分辨率更高,其聚類分析結(jié)果與流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果一致,可用于豬鏈球菌疫情的病因溯源追蹤。
[Abstract]:In recent years , the resistance and molecular characteristics of serotype 2 strains of S.mutans were analyzed by using the method of PCR . The results showed that the strains in Jiangsu Province , which were isolated from Nantong patients in 1998 and 2005 , were resistant to the widespread use and even abuse of other resistant genes or drug resistance genes .

【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R446.5

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1 劉軍,馮書章,尹鐵勇,孫洋,郭學(xué)軍,祝令偉;豬鏈球菌2型和9型菌株的多重PCR檢測[J];中國人獸共患病雜志;2005年06期

2 ;事件[J];中國處方藥;2005年08期

3 萬遂如;我國豬鏈球菌Ⅱ型流行情況與人類健康[J];動物科學(xué)與動物醫(yī)學(xué);2005年04期

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