本文關(guān)鍵詞：核黃素光化學(xué)法對(duì)紅細(xì)胞的影響以及對(duì)淋巴細(xì)胞滅活效果的研究　出處：《華東師范大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：背景輸血是近代醫(yī)學(xué)救死扶傷的重要手段,另一方面,輸血亦可能存在導(dǎo)致受血者遭遇經(jīng)血傳播病原體感染的風(fēng)險(xiǎn)。目前,防止輸血傳播疾病的主要方法是血液病原體篩查,但現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)由于病原體基因變異、免疫原性的改變以及感染的“窗口期”,小概率的漏檢事件在所難免,更何況血液檢測(cè)涵蓋范圍十分有限,除艾滋病病毒(HIV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)及梅毒螺旋體外,至少有包括人類T細(xì)胞白血病病毒(HTLV)、巨細(xì)胞病毒(MCV)、EB病毒(EBV)及T淋巴細(xì)胞等數(shù)十種可經(jīng)血傳播的病原體未列入檢測(cè)范圍,因此,僅依靠血液篩檢,不可能完全杜絕輸血傳播疾病的風(fēng)險(xiǎn),而血液及血液成分病原體滅活技術(shù)被認(rèn)為是從根本上徹底杜絕輸血相關(guān)病原體通過(guò)輸血途徑傳遞,保證輸血安全的最可靠屏障,血液病原體滅活方法及其機(jī)理的研究也因此成為輸血醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。血液病原體滅活技術(shù)主要有亞甲藍(lán)光化學(xué)法、補(bǔ)骨脂素S-59法、核黃素光化學(xué)法、S-303病原體滅活技術(shù)、PEN-110病原體滅活技術(shù)等。其中用于血漿的病原體滅活技術(shù)主要以亞甲藍(lán)光化學(xué)法為主,血小板的病原體滅活技術(shù)多采用補(bǔ)骨脂素S-59法和核黃素光化學(xué)法。目前,尚未有適用于全血的病原體滅活技術(shù)。異體淋巴細(xì)胞可在免疫功能低下的受血者體內(nèi)大量增殖,最終將受血者機(jī)體作為異物排斥,形成輸血相關(guān)移植物抗宿主病(TA-GVHD),該病死亡率可達(dá)90%以上,故異體淋巴細(xì)胞在輸血醫(yī)學(xué)上被視為是一種特殊的病原體�，F(xiàn)知核黃素光化學(xué)法能夠有效滅活淋巴細(xì)胞,但在滅活淋巴細(xì)胞的同時(shí)會(huì)否對(duì)紅細(xì)胞造成不良影響,尚缺乏深入的研究。本研究旨在探討可見光激發(fā)的核黃素光化學(xué)方法,對(duì)淋巴細(xì)胞的滅活效果及對(duì)紅細(xì)胞的影響,為最終建立核黃素光化學(xué)紅細(xì)胞乃至全血病原體滅活技術(shù)進(jìn)行方法學(xué)實(shí)踐和數(shù)據(jù)積累。目的研究420nm可見光下核黃素光化學(xué)法對(duì)紅細(xì)胞變形能力、膜結(jié)構(gòu)、形態(tài)、代謝能力、活力、功能等的影響；對(duì)淋巴細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)和活性、增殖、凋亡狀況和細(xì)胞因子分泌能力等的影響。方法1)將全血分為兩組：實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組加入核黃素(終濃度：100μmol/L),置于4℃病原體滅活箱中,420rnm可見光下進(jìn)行雙側(cè)照射,照射劑量為40J/mL,對(duì)照組不加核黃素,不光照。2)用血?dú)夥治鰞x檢測(cè)0d、7d、21d、35d、42d時(shí)全血中紅細(xì)胞的鉀離子水平、血紅蛋白氧飽和度、葡萄糖含量(Glucose content,Glu)、乳酸含量(Lactic acid content,Lac)等。3)分離全血中的紅細(xì)胞,以一定比例重懸于紅細(xì)胞保存液中,于保存0d、7d、21d、35d、42d時(shí)檢測(cè)紅細(xì)胞滲透脆性、游離血紅蛋白含量、溶血率、紅細(xì)胞數(shù)量(Red blood cell count,RBC)、紅細(xì)胞壓積(Hematocrit, Hct)、血紅蛋白含量(Hemoglobin content,Hgb)、ATP含量、2,3-DPG含量。4)分離淋巴細(xì)胞,計(jì)數(shù),體外培養(yǎng),CD3/CD28抗體刺激增殖,培養(yǎng)3d檢測(cè)淋巴細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)、活性、增殖能力、凋亡狀況以及細(xì)胞因子分泌狀況。研究CD3/CD28抗體刺激前后,核黃素光化學(xué)法處理對(duì)淋巴細(xì)胞的滅活效果。結(jié)果 1、可見光下核黃素光化學(xué)法對(duì)紅細(xì)胞形態(tài)如紅細(xì)胞數(shù)量、血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積沒有影響；對(duì)紅細(xì)胞代謝如葡萄糖含量、乳酸含量沒有影響；對(duì)紅細(xì)胞活力指標(biāo)ATP含量沒有影響；對(duì)紅細(xì)胞功能指標(biāo)如血紅蛋白氧飽和度、2,3-DPG含量沒有影響；對(duì)紅細(xì)胞變形能力如滲透脆性沒有顯著影響,對(duì)紅細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的檢測(cè)指標(biāo)如細(xì)胞外游離血紅蛋白含量和K+濃度有一定影響,但溶血率仍然滿足歐美和我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)。2、核黃素光化學(xué)法使淋巴細(xì)胞形態(tài)改變、活性減弱、增殖能力減弱、凋亡增強(qiáng)、細(xì)胞因子分泌減少。結(jié)論核黃素光化學(xué)法對(duì)紅細(xì)胞變形能力、膜結(jié)構(gòu)、形態(tài)、代謝能力、活力、功能等的影響在可接受范圍內(nèi),滅活淋巴細(xì)胞效果良好。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R457.1

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本文編號(hào)：1348408