發(fā)布時間：2017-12-29 02:18

  本文關鍵詞：核黃素光化學法對紅細胞的影響以及對淋巴細胞滅活效果的研究　出處：《華東師范大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：背景輸血是近代醫(yī)學救死扶傷的重要手段,另一方面,輸血亦可能存在導致受血者遭遇經(jīng)血傳播病原體感染的風險。目前,防止輸血傳播疾病的主要方法是血液病原體篩查,但現(xiàn)有檢測技術由于病原體基因變異、免疫原性的改變以及感染的“窗口期”,小概率的漏檢事件在所難免,更何況血液檢測涵蓋范圍十分有限,除艾滋病病毒(HIV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)及梅毒螺旋體外,至少有包括人類T細胞白血病病毒(HTLV)、巨細胞病毒(MCV)、EB病毒(EBV)及T淋巴細胞等數(shù)十種可經(jīng)血傳播的病原體未列入檢測范圍,因此,僅依靠血液篩檢,不可能完全杜絕輸血傳播疾病的風險,而血液及血液成分病原體滅活技術被認為是從根本上徹底杜絕輸血相關病原體通過輸血途徑傳遞,保證輸血安全的最可靠屏障,血液病原體滅活方法及其機理的研究也因此成為輸血醫(yī)學研究的熱點。血液病原體滅活技術主要有亞甲藍光化學法、補骨脂素S-59法、核黃素光化學法、S-303病原體滅活技術、PEN-110病原體滅活技術等。其中用于血漿的病原體滅活技術主要以亞甲藍光化學法為主,血小板的病原體滅活技術多采用補骨脂素S-59法和核黃素光化學法。目前,尚未有適用于全血的病原體滅活技術。異體淋巴細胞可在免疫功能低下的受血者體內(nèi)大量增殖,最終將受血者機體作為異物排斥,形成輸血相關移植物抗宿主病(TA-GVHD),該病死亡率可達90%以上,故異體淋巴細胞在輸血醫(yī)學上被視為是一種特殊的病原體�，F(xiàn)知核黃素光化學法能夠有效滅活淋巴細胞,但在滅活淋巴細胞的同時會否對紅細胞造成不良影響,尚缺乏深入的研究。本研究旨在探討可見光激發(fā)的核黃素光化學方法,對淋巴細胞的滅活效果及對紅細胞的影響,為最終建立核黃素光化學紅細胞乃至全血病原體滅活技術進行方法學實踐和數(shù)據(jù)積累。目的研究420nm可見光下核黃素光化學法對紅細胞變形能力、膜結(jié)構、形態(tài)、代謝能力、活力、功能等的影響；對淋巴細胞細胞形態(tài)和活性、增殖、凋亡狀況和細胞因子分泌能力等的影響。方法1)將全血分為兩組：實驗組和對照組。實驗組加入核黃素(終濃度：100μmol/L),置于4℃病原體滅活箱中,420rnm可見光下進行雙側(cè)照射,照射劑量為40J/mL,對照組不加核黃素,不光照。2)用血氣分析儀檢測0d、7d、21d、35d、42d時全血中紅細胞的鉀離子水平、血紅蛋白氧飽和度、葡萄糖含量(Glucose content,Glu)、乳酸含量(Lactic acid content,Lac)等。3)分離全血中的紅細胞,以一定比例重懸于紅細胞保存液中,于保存0d、7d、21d、35d、42d時檢測紅細胞滲透脆性、游離血紅蛋白含量、溶血率、紅細胞數(shù)量(Red blood cell count,RBC)、紅細胞壓積(Hematocrit, Hct)、血紅蛋白含量(Hemoglobin content,Hgb)、ATP含量、2,3-DPG含量。4)分離淋巴細胞,計數(shù),體外培養(yǎng),CD3/CD28抗體刺激增殖,培養(yǎng)3d檢測淋巴細胞的細胞形態(tài)、活性、增殖能力、凋亡狀況以及細胞因子分泌狀況。研究CD3/CD28抗體刺激前后,核黃素光化學法處理對淋巴細胞的滅活效果。結(jié)果 1、可見光下核黃素光化學法對紅細胞形態(tài)如紅細胞數(shù)量、血紅蛋白含量、紅細胞壓積沒有影響；對紅細胞代謝如葡萄糖含量、乳酸含量沒有影響；對紅細胞活力指標ATP含量沒有影響；對紅細胞功能指標如血紅蛋白氧飽和度、2,3-DPG含量沒有影響；對紅細胞變形能力如滲透脆性沒有顯著影響,對紅細胞膜結(jié)構的檢測指標如細胞外游離血紅蛋白含量和K+濃度有一定影響,但溶血率仍然滿足歐美和我國標準。2、核黃素光化學法使淋巴細胞形態(tài)改變、活性減弱、增殖能力減弱、凋亡增強、細胞因子分泌減少。結(jié)論核黃素光化學法對紅細胞變形能力、膜結(jié)構、形態(tài)、代謝能力、活力、功能等的影響在可接受范圍內(nèi),滅活淋巴細胞效果良好。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：華東師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R457.1

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本文編號：1348408