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肺炎克雷伯分離株耐藥性和毒力基因的相關(guān)性研究

發(fā)布時間:2017-12-28 10:31

  本文關(guān)鍵詞:肺炎克雷伯分離株耐藥性和毒力基因的相關(guān)性研究 出處:《蘇州大學》2015年碩士論文 論文類型:學位論文


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【摘要】:目的:為了解肺炎克雷伯菌的耐藥性和毒力基因的相關(guān)性,本研究通過對肺炎克雷伯菌臨床分離株的耐藥性及毒力基因進行分析,了解其耐藥譜和毒力基因分布,并分析兩者間的相關(guān)性,為臨床治療提供理論基礎。同時作同源性分析,分析肺炎克雷伯菌間的種系發(fā)生關(guān)系,為菌株的變異、分化、傳播尋找規(guī)律。方法:通過收集119株肺炎克雷伯分離株,對其采用藥敏紙片法分析耐藥性,用PCR技術(shù)檢測耐藥基因SHV、TEM、CTX-M、OXA篩選肺炎克雷伯菌株中的ESBLs菌株,用PCR技術(shù)檢測7種毒力基因rmp A、aer-1、aer-2、mag A、gyrb-2、ybt、wca G,比較ESBLs肺炎克雷伯菌菌株與非ESBLs肺炎克雷伯菌菌株之間毒力基因分布率,分析多重耐藥和毒力基因分布,并分析兩者間的相關(guān)性。用Bio Edit軟件編輯序列,截成有相同數(shù)目位點的片段,用MEGA-4作聚類性和種系發(fā)生樹進行同源性分析。結(jié)果:119株肺炎克雷伯分離株篩選耐藥基因SHV、TEM、CTX-M、OXA檢測出的陽性菌分別為18、20、26、6株,篩選出ESBLs肺炎克雷伯菌32株。119株肺炎克雷伯菌臨床分離株進行多重耐藥譜的分析,耐三種及以上抗菌藥物的多重耐藥率達可達41.17%,耐8-12種抗生素的菌株占得30.25%。119株肺炎克雷伯臨床分離株中不同毒力基因的檢出率之間差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。119株肺炎克雷伯臨床分離株中含有2種、3種、4種、5種不同毒力基因的菌株占有率相對較高,均在15%以上。對ESBLs與非ESBLs肺炎克雷伯菌菌株之間毒力基因分布率的比較,可明顯看出ESBLs的肺炎克雷伯菌的毒力基因分布率較非ESBLs分布率低很多。對分離株的多重耐藥率和毒力基因數(shù)進行相關(guān)性分析,毒力基因分布數(shù)與耐藥性間的相關(guān)系數(shù)為-0.227(P0.05),呈負相關(guān),具有顯著性差異,表明毒力基因數(shù)與耐藥性間有顯著相關(guān)性;也就是說,毒力基因分布數(shù)越多的菌株,多重耐藥現(xiàn)象出現(xiàn)的幾率就越小。毒力基因分布數(shù)與耐藥基因數(shù)間的相關(guān)系數(shù)為-0.195(P0.05),呈負相關(guān),具有顯著性差異,表明毒力基因數(shù)與耐藥基因數(shù)間有顯著相關(guān)性;也就是說,毒力基因分布數(shù)越多的菌株,耐藥基因分布數(shù)出現(xiàn)的幾率就越小。用MEGA-4作出種系發(fā)生樹如下圖,共有A、B、C、D、E、F六個群,由圖表看出A群為優(yōu)勢群,其次為B群。ESBLs主要在A群,其他群主要以非ESBLs為主。在A群中,非ESBLs中含有的毒力基因相對其他群非ESBLs中含有的毒力基因少,通過對應前面的耐藥與毒力的關(guān)系,可發(fā)現(xiàn)B、C、D、E、F分類群是多毒力基因群,A群是少毒力基因群。各菌群間同源性較高,存在某一克隆群的暴發(fā)。結(jié)論:肺炎克雷伯菌的耐藥性與毒力基因分布存在著相關(guān)性,更傾向于存在負相關(guān),毒力基因分布數(shù)越多的分離株,多重耐藥現(xiàn)象出現(xiàn)的概率就越小,為臨床上對該菌合理的治療及抗生素的合理的使用提供了一些理論依據(jù)。根據(jù)種系發(fā)生樹看出,院內(nèi)感染的肺炎克雷伯菌有某一克隆株的流行和傳播。
[Abstract]:Objective: to correlation between antibiotic resistance and virulence gene solutions of Klebsiella pneumoniae isolated from this study, through the analysis of drug resistance and virulence genes of Klebsiella pneumoniae clinical isolates, the resistance spectrum distribution and virulence genes, and to analyze the correlation between the two, providing a theoretical basis for the clinical treatment of. At the same time, the homology analysis was used to analyze the relationship between Klebsiella pneumoniae (Klebsiella pneumoniae) and the variation, differentiation and propagation of the strains. Methods: by collecting 119 strains of Klebsiella pneumoniae isolates, the Kirby Bauer method analysis of drug resistance, screening ESBLs isolates of Klebsiella pneumoniae strains using PCR technique for the detection of resistance genes SHV, TEM, CTX-M, OXA, PCR detection of 7 virulence genes RMP, A, aer-1, aer-2, MAG, A gyrb-2, YBT, WCA, G, ESBLs between Klebsiella pneumoniae strains and non ESBLs Klebsiella pneumoniae virulence gene distribution, analysis of the distribution of multidrug resistance and virulence genes, and to analyze the correlation between the two. The sequence of Bio Edit software was used to cut into fragments with the same number of loci, and MEGA-4 was used as a clustering and phylogeny tree to analyze the homology. Results: 119 strains of Klebsiella pneumoniae isolates were screened for resistance genes SHV, TEM, CTX-M and OXA. The positive bacteria were 18, 20, 26 and 6, respectively. 32 strains of ESBLs Klebsiella pneumoniae were screened out. 119 strains of Klebsiella pneumoniae clinical isolates were analyzed for multi drug resistance. The multi drug resistance rate of three or more antibiotics was up to 41.17%, and that of 8-12 kinds of antibiotics accounted for 30.25%. The differences in the detection rates of different virulence genes in 119 klebber clinical isolates were statistically significant (P0.05). The 119 strains of klebber clinical isolates containing 2, 3, 4 and 5 different virulence genes were relatively high, all of which were above 15%. Comparing the distribution of virulence genes between ESBLs and non ESBLs Klebsiella pneumoniae, it is obvious that the distribution of virulence genes in ESBLs is much lower than that in non ESBLs. The correlation analysis of the rate of multi drug resistance and virulence gene number of isolates, the distribution of the correlation coefficient between the number of virulence genes and drug resistance of -0.227 (P0.05), negative correlation, with a significant difference, indicate the number of virulence genes and drug resistance are significantly correlated; that is to say, the more the number of virulence gene distribution of strains, probability the emergence of multi drug resistance phenomenon is smaller. The correlation coefficient distribution of virulence genes and resistance genes between the number of the number of -0.195 (P0.05), negative correlation, with a significant difference, indicate the number of virulence genes and resistance gene number was significantly correlated; that is to say, the more the number of virulence gene distribution of strains, the probability distribution of resistance genes in the number of smaller. Using MEGA-4 to make the tree of lineage generation as below, there are six groups of A, B, C, D, E, F, and the chart shows that A group is the dominant group, followed by the B group. ESBLs is mainly in the A group, and the other groups are mainly non - ESBLs. In the A group, the virulence genes in non ESBLs contain less virulence genes than those in other ESBLs groups. By means of the corresponding relationship between resistance and virulence, it can be found that B, C, D, E and F have multiple virulence genes, and A group is a virulence gene group. The homology of each group was high, and there was a outbreak of a clone. Conclusion: the drug resistance and virulence gene distribution of Klebsiella pneumoniae correlation exists, more likely to have negative correlation, the distribution of virulence genes number of isolates, the probability of the emergence of multi drug resistance phenomenon is smaller, and provides some theoretical basis for clinical treatment of the bacteria and antibiotics reasonable reasonable use. According to the phylogeny tree, the infection of Klebsiella pneumoniae has the prevalence and spread of a clone.
【學位授予單位】:蘇州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R446.5

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本文編號:1345581

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